Extraction et dosage quantitatif de l’ADN par méthode fluorimétrique : application à l’ADN humain et à l’ADN viral
Loading...
Date
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Université Sétif1 Ferhat Abbas. Faculté de Médecine. Déppartement de Pharmacie
Abstract
DNA extraction is a critical step in molecular biology, determining the reliability of
downstream analyses, whether for genetic mutation detection or pathogen identification. This
study aimed to evaluate the influence of various factors (sample type, storage conditions,
temperature, and storage duration) on the quality and quantity of extracted DNA, both human
and viral. DNA extraction was carried out using a commercial spin column kit, followed by
fluorometric quantification with the Qubit method. The results showed a wide range of DNA
concentrations depending on sample processing conditions, with levels varying from low to
high based on preservation, cell type, and storage time. The protocol proved to be sensitive,
reproducible, and suitable for molecular biology requirements. The findings highlight the
importance of an optimized and rigorous protocol to ensure reliable results, particularly for
genetic and virological diagnostics.
Description
يعد استخلاص الحمض النووي خطوة حاسمة في علم الاحياء الجزيئي، اذ يحدد موثوقية التحاليل اللاحقة، سواء تعلق الامر بالكشف عن الطفرات الجينية
او العوامل الممرضة، يهدف هذا العمل الى تقييم تأثير عوامل محتفلة( نوع العينة، ظروف العمل. درجة الحرارة. مدة التخزين( على جودة وكمية الحمض
النووي المستخلص. سوآءا كان بشريا او فيروسيا.
تم استخلاص باستخدام مجموعة تجارية تعتمد على أعمدة الفصل، تليه قياس فلوروميتري باستخدام جهازكيوبيت لقياس الحمض النووي. أظهرت النتائج
الملخصة عليها وجود تباين في تراكيز الحمض النووي باختلاف طرق المعالجة بقيم تراوحت بين منخفضة الى مرتفعة دجا وذلك حسب ظروف
الحفظ، نوع العينة ومدة التخزين. لقد اثبت هذا البروتوكول حساسيته، قابليته للتكرار، وملائمته لمتطلبات التحاليل في علم الاحياء الجزيئي. وتبرز الدراسة الحاجة
الى بروتوكول صارم ومحسن لضمان نتائج موثوقة. خصوصا في سياق التشخيص الجيني والفيزيولوجي
